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上一期文章我们总结了“物、化、生”三大类转染法的优劣势,总结如下:
本期我们将深入了解电穿孔法中,目前在Google Scholar已有42,100+篇文献所提及的Nucleofector™技术,消化完本文后文末有答题抽奖活动,奖项丰富,为你的开学季更添助力!
前情提要
1998年,Nucleofector™技术由Amaxa公司开发(该公司于2008年被Lonza收购),并于2001年成为广大科研人员可以使用的技术(Nucleofector™ I/II/IIb)。该技术基于电脉冲在细胞膜上瞬间产生小孔,综合Lonza独创的转染体系(即细微差别的电脉冲条件和细胞特异性试剂的组合),使核酸底物可以直接进入细胞核,让细胞的最高转染效率可以达到99%,细胞转染不依赖于细胞的增殖分裂。随后,Lonza在2010年推出新一代电转染系列4D Nucleofector™,并且在2021年推出第二代4D Nucleofector™核转染平台。
随着系统生物学与交叉学科方法的应用,要求细胞和系统模型越来越接近体内细胞的功能。Nucleofector™技术就是为了尝试从根本上解决细胞转染效率与成活率问题,无论是原代细胞(干细胞、神经细胞、免疫细胞等),还是细胞系,每次都可重复出很高的转染效率。
在Google Scholar用“Nucleofector”来检索,已经有42,100+篇文献提及Nucleofector™技术。检索Nucleofector+“CRISPR”,一共有12,800+篇,数量每日递增中。
化学顶级综述杂志Chemical Reviews文章对Nucleofection™技术的评价是:
Nucleofection™技术是有史以来最流行的电转系统之一,于21世纪初问世,作为一种有效的细胞内递送方法迅速获得普及。
Lonza 4D Nucleofector™平台从实际需求出发,开发了从低通量到高通量,小体积到大体积的电转染,研发到生产规模的设备型号,保证从小体系筛选到大规模电转的可行性和放大工艺可转移。包括如下功能模块并匹配对应应用方向:
并且只需5步简单的操作方案,
即可实现轻松电转!
4D-Nucleofector™ 核转系统,除了电转仪设备本身之外,还有不同细胞专属的电转试剂,可以支持在不同类型的细胞中都可以实现高效的,同时维持细胞功能的转染结果。该系统改进了传统金属电极材质的电极杯,通过一种专利技术利用高分子导电聚合物稳定电脉冲发生的过程,避免金属离子释放对细胞本身带来的金属离子毒性影响。在Lonza Bioscience官网Knowledge Center里面呈现了超过700种即用型protocol(包括细胞培养,传代、电转准备、电转方案、孵育方法以及优化方案)及海量的资料和应用FAQ(且一直在实际各地技术团队的协作下不断更新)。这也是Lonza电转产品的又一个重要特色,让大家在电转系统的使用中轻松上手,实验操作无忧。
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