AlphaScreen GST Detection Kit-Revvity-瑞孚迪
产品参数
产品货号 产品名称 规格
6760603R AlphaScreen GST Detection Kit GST 50K PTS

 

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这款试剂盒可应用于:

  1. 蛋白质 - 蛋白质相互作用分析;
  2. 蛋白质 - 多肽相互作用分析;
  3. GST 标记蛋白的检测和定量;
  4. 蛋白质表达;
  5. 结合活性研究。

 

在典型的 AlphaScreen®分析中,感兴趣的生物分子被生物素化并与链霉亲和素包被的供体珠子结合。另一种生物分子带有 GST 标签,并与 AlphaScreen® 抗 GST 受体珠子结合。如果这两种生物分子相互结合,供体和受体珠子就会靠近。激发供体珠子会导致单线态氧的释放,单线态氧扩散并在受体珠子靠近时触发其发光。光的量与相互作用的程度成正比。使用试剂盒中提供的生物素化 GST 探针也可以进行竞争形式的分析。

 

AlphaScreen® 和 AlphaLISA™是基于珠子的分析技术,用于以微孔板形式研究生物分子相互作用。首字母缩略词 “Alpha” 代表放大的发光邻近均相分析。顾名思义,这些技术的一些关键特征为它们是非放射性的均相分析。捕获在珠子上的分子结合会导致能量从一个珠子转移到另一个珠子,最终产生发光/荧光信号。要理解信号是如何产生的,必须首先了解珠子。AlphaScreen® 和 AlphaLISA™分析需要两种珠子类型:供体珠子和受体珠子。每种珠子类型都含有不同的专有的化学混合物,这是 AlphaScreen® 技术的关键要素。供体珠子含有光敏剂酞菁,在680nm 光照下,它将环境中的氧气转化为激发态和活性形式的 O2,即单线态氧。请注意,单线态氧不是自由基;它是具有单个激发电子的分子氧。像其他激发分子一样,单线态氧在回到基态之前具有有限的寿命。在其 4 微秒的半衰期内,单线态氧在溶液中可以扩散约 200 纳米。如果受体珠子在这个邻近范围内,能量就会从单线态氧转移到受体珠子内的噻嗯衍生物中,随后在 520 - 620nm(AlphaScreen)或 615nm(AlphaLISA)处产生光。在没有受体珠子的情况下,单线态氧回到基态,不会产生信号。这种依赖于邻近度的化学能量转移是 AlphaScreen 均相性质的基础。

 

 

产品特点

 

瑞孚迪(Revvity)是瑞孚迪生物医学(上海)有限公司旗下品牌,将“不可能”视为灵感,将“做不到”视为原动力。瑞孚迪提供健康科学解决方案、前沿技术和专业服务,业务涵盖科研探索、开发、诊断、治疗的端到端全流程。依托在转化多组学技术、生物标志物鉴定、成像、疾病的预测、筛查、检测与诊断、信息学等领域的多年深耕,瑞孚迪正以科技之能,突破人类潜能的边界。

 

2023年瑞孚迪的营业额超过27亿美元,全球拥有11,000多名员工,为制药和生物技术企业、诊断实验室、科研机构和政府机构等客户提供多样化服务。公司是标准普尔500指数的成员,客户遍及全球190多个国家和地区。

Q:HTRF和AlphaLISA适合如何选择?

A:HTRF和Alpha两种方法各有优势,首先确认酶标仪是否具有相应的模块,如果都具备,从实验便利性和数据呈现来看,HTRF操作更方便,但是Alpha数据表现、样本适应性上优势明显,客户根据自己需求进行选择。

 

Q:为什么样本稀释倍数越低,试剂盒测出的待检物质的含量反而越低?

A:按照经验来看,应该是出现hook效应了,一般用夹心法检测的话,如果样品的浓度远超过标曲的线性范围,就会出现测量结果降低的情况,需要对样品做进一步的稀释。

 

Q:如何查产品效期?

A:首先看说明书,如果说明书没有明确的保质期,则用产品货号在revvity官网查到该产品的页面,页面最下方有该产品的data sheet,data sheet里面有具体的保质期限。

 

Q:ALSU和TBSU是什么?有什么区别?

A:ALSU:Alpha Surefire Ultra kit,在研究信号通路的磷酸化蛋白的检测中,需要使用的是Alpha Surefire系列产品。
TBSU:Terbium SureFire Ultra kit,试剂盒旨在与标准的ALSU试剂盒结合使用,以进行磷酸化双靶点检测,目前,Alpha可提供30余种TBSU的检测kit。TBSU试剂盒通过铽(Tb)受体微珠检测感兴趣的靶点,而ALSU试剂盒则通过铕(Eu)AlphaLISA 受体微珠进行检测,TBSU因为缺少相关缓冲液,不能单独使用。

 

Q:加Alpha供体微珠时,可以用什么光?

A:避光或者用绿光、黄光。

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