HTRF HUMAN TNF ALPHA KIT-Revvity

肿瘤坏死因子 α（TNF alpha）是一种主要由巨噬细胞、T 细胞和中性粒细胞产生的细胞因子。TNF alpha 对中性粒细胞起化学吸引作用，并促进炎症部位的浸润和活化。TNF alpha 与多种癌症类型有关，因其具有促进血管生成和细胞增殖以及抑制细胞凋亡的能力。

对血清样本的评估通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测可能具有足够的灵敏度，能够检测血清或血浆中的低水平分析物。在进行检测时，始终遵循推荐的方案，并避免高度溶血的样本。

产品特点

检测原理：
细胞上清液、样本或标准品直接分配到检测板中，通过 HTRF® 试剂进行检测（384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板，20 微升）。用 HTRF 供体和受体标记的抗体预先混合，并在一个分配步骤中加入，以进一步简化检测程序。通过简单地按比例调整每次添加的体积，该检测可以扩展到 1536 孔格式。

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检测数据分析：
四参数逻辑（4PL）曲线通常被推荐用于拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比，这种回归能够在更宽的浓度范围内准确测量未知样本，使其非常适合用于分析细胞因子释放等生物系统。

为了充分了解如何处理 HTRF 数据处理以及 4PL 1/y² 拟合，Revvity 还与 Myassays.com 合作，帮助你进行数据分析。你将能够访问一个免费的在线软件来进行你的 TNF alpha 分析。

检测细节：
人 TNF alpha 试剂盒的技术规格

分析性能：
批内和批间

稀释线性：
从这些实验中获得的出色的回收率百分比显示了该检测的良好线性。

加标回收：

检测验证：
用 JTE607 抑制 THP1 细胞中 TNF alpha 的分泌：
以每孔 100,000 个细胞的密度接种 THP1 细胞，用不断增加浓度的 JTE607 孵育 18 小时，然后用 2 µg/mL 的 LPS 刺激 3 小时。然后将 16 µL 的上清液转移到白色检测板（384 孔低体积）中，用人 TNFα 检测进行分析。

LPS 刺激的外周血单个核细胞（PBMC）中 TNF alpha 的分泌：
以每孔 50,000、100,000、200,000 和 400,000 个细胞的密度接种 PBMC，用不断增加浓度的 LPS（0、0.02、0.2、2 µg/mL）刺激 3 小时。然后将 16 µL 的上清液转移到白色检测板（384 孔低体积）中，用人 TNFα 检测进行分析。

瑞孚迪（Revvity）是瑞孚迪生物医学（上海）有限公司旗下品牌，将“不可能”视为灵感，将“做不到”视为原动力。瑞孚迪提供健康科学解决方案、前沿技术和专业服务，业务涵盖科研探索、开发、诊断、治疗的端到端全流程。依托在转化多组学技术、生物标志物鉴定、成像、疾病的预测、筛查、检测与诊断、信息学等领域的多年深耕，瑞孚迪正以科技之能，突破人类潜能的边界。

2023年瑞孚迪的营业额超过27亿美元，全球拥有11,000多名员工，为制药和生物技术企业、诊断实验室、科研机构和政府机构等客户提供多样化服务。公司是标准普尔500指数的成员，客户遍及全球190多个国家和地区。

Q：HTRF和AlphaLISA适合如何选择？

A：HTRF和Alpha两种方法各有优势，首先确认酶标仪是否具有相应的模块，如果都具备，从实验便利性和数据呈现来看，HTRF操作更方便，但是Alpha数据表现、样本适应性上优势明显，客户根据自己需求进行选择。

Q：为什么样本稀释倍数越低，试剂盒测出的待检物质的含量反而越低？

A：按照经验来看，应该是出现hook效应了，一般用夹心法检测的话，如果样品的浓度远超过标曲的线性范围，就会出现测量结果降低的情况，需要对样品做进一步的稀释。

Q：搭配HTRF浅孔板货号？

A：96孔浅孔板：66PL96001（1个板子），66PL96005（5个板子），66PL96025（25个板子），66PL96100（100个板子）
384孔板：6008280（50个板子），6008289（200个板子）。

Q：如何查产品效期？

A：首先看说明书，如果说明书没有明确的保质期，则用产品货号在revvity官网查到该产品的页面，页面最下方有该产品的data sheet，data sheet里面有具体的保质期限。

Q：细胞因子试剂盒标准品如何保存？在-80度可以保存多久？

A：标准品溶解后建议分装放在-80度可保存6个月。不建议4度保存。

Q：HTRF细胞因子检测试剂盒V2 High performance版本，比正常试剂盒有哪些升级？

A：一般是检测灵敏度提升，检测窗口升高，建议直接使用high performance版本。

Q：鼠源的细胞因子检测试剂盒里面的Diluent和Detect buffer和人的细胞因子检测试剂盒里是通用的吗？

A：HTRF细胞因子类产品里的diluent buffer都是一样的，Detection buffer 同理也是。

Q：HTRF human TNF-α试剂盒的LOD和LOQ的计算公式是什么？

A：LOD计算公式：Std 0 mean＋2 SD
LOQ计算公式：1.2x Std 0 mean

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产品货号	产品名称	规格
62HTNFAPEG	HTRF HUMAN TNF ALPHA KIT	500 PTS
62HTNFAPEH	HTRF HUMAN TNF ALPHA KIT	10K PTS

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