产品货号 | 产品名称 | 规格 |
62HIL06PEH | HTRF HUMAN IL6 KIT | 10K PTS |
白细胞介素 6(IL6)是一种促炎细胞因子,参与急性期反应、炎症和癌症进展。它由 T 细胞、巨噬细胞和成纤维细胞分泌,可诱导 B 细胞和 T 细胞增殖。它在包括糖尿病、阿尔茨海默病、抑郁症和多种癌症在内的广泛研究领域中被研究。与转化生长因子 β(TGF beta)一起,IL6 是 T 细胞分化为 TH17 的主要促进因子,TH17 是免疫肿瘤学的一个新组成部分。
对血清样本的评估通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测可能具有足够的灵敏度,能够检测血清或血浆中的低水平分析物。
检测原理:
细胞上清液、样本或标准品直接分配到检测板中,通过 HTRF® 试剂进行检测(384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板,20 微升)。用 HTRF 供体和受体标记的抗体预先混合,并在一个分配步骤中加入,以进一步简化检测程序。通过简单地按比例调整每次添加的体积,该检测可以扩展到 1536 孔格式。
检测数据分析:
四参数逻辑(4PL)曲线通常被推荐用于拟合 ELISA 标准曲线。这种回归能够在比线性分析更宽的浓度范围内准确测量未知样本,使其非常适合用于分析细胞因子释放等生物系统。
检测细节:
人 IL6 试剂盒的技术规格
分析性能:
批内和批间
稀释线性:
从这些实验中获得的出色的回收率百分比显示了该检测的良好线性。
加标回收:
将重组细胞因子添加到血清样本中,并将从标准曲线获得的响应与计算出的预期值进行比较。观察到的 100% 回收率验证了用于该检测的样本基质。
检测验证:
用 JTE607 抑制 THP1 细胞中 IL6 的分泌:
以每孔 100,000 个细胞的密度接种 THP1 细胞,在存在 2 µg/mL LPS 的情况下,用不断增加浓度的 JTE607 孵育 18 小时。然后将 16 µL 的上清液转移到白色检测板(384 孔低体积)中,用人 IL6 检测进行分析。
LPS 刺激的外周血单个核细胞(PBMC)中 IL6 的分泌:
以每孔 50,000、100,000 和 400,000 个细胞的密度接种 PBMC,用不断增加浓度的 LPS(0、0.02、0.2、2 µg/mL)刺激 18 小时。然后将 16 µL 的上清液转移到白色检测板(384 孔低体积)中,用人 IL6 检测进行分析。
瑞孚迪(Revvity)是瑞孚迪生物医学(上海)有限公司旗下品牌,将“不可能”视为灵感,将“做不到”视为原动力。瑞孚迪提供健康科学解决方案、前沿技术和专业服务,业务涵盖科研探索、开发、诊断、治疗的端到端全流程。依托在转化多组学技术、生物标志物鉴定、成像、疾病的预测、筛查、检测与诊断、信息学等领域的多年深耕,瑞孚迪正以科技之能,突破人类潜能的边界。
2023年瑞孚迪的营业额超过27亿美元,全球拥有11,000多名员工,为制药和生物技术企业、诊断实验室、科研机构和政府机构等客户提供多样化服务。公司是标准普尔500指数的成员,客户遍及全球190多个国家和地区。
Q:HTRF和AlphaLISA适合如何选择?
A:HTRF和Alpha两种方法各有优势,首先确认酶标仪是否具有相应的模块,如果都具备,从实验便利性和数据呈现来看,HTRF操作更方便,但是Alpha数据表现、样本适应性上优势明显,客户根据自己需求进行选择。
Q:为什么样本稀释倍数越低,试剂盒测出的待检物质的含量反而越低?
A:按照经验来看,应该是出现hook效应了,一般用夹心法检测的话,如果样品的浓度远超过标曲的线性范围,就会出现测量结果降低的情况,需要对样品做进一步的稀释。
Q:搭配HTRF浅孔板货号?
A:96孔浅孔板:66PL96001(1个板子),66PL96005(5个板子),66PL96025(25个板子),66PL96100(100个板子)
384孔板:6008280(50个板子),6008289(200个板子)。
Q:如何查产品效期?
A:首先看说明书,如果说明书没有明确的保质期,则用产品货号在revvity官网查到该产品的页面,页面最下方有该产品的data sheet,data sheet里面有具体的保质期限。
Q:细胞因子试剂盒标准品如何保存?在-80度可以保存多久?
A:标准品溶解后建议分装放在-80度可保存6个月。不建议4度保存。
Q:HTRF细胞因子检测试剂盒V2 High performance版本,比正常试剂盒有哪些升级?
A:一般是检测灵敏度提升,检测窗口升高,建议直接使用high performance版本。
Q:鼠源的细胞因子检测试剂盒里面的Diluent和Detect buffer和人的细胞因子检测试剂盒里是通用的吗?
A:HTRF细胞因子类产品里的diluent buffer都是一样的,Detection buffer 同理也是。
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