HTRF STREPTAVIDIN TB cryptate-Revvity

链霉亲和素已用铽穴状化合物（Tb crypate）进行标记。生物素与链霉亲和素以高亲和力结合（Ka = 1015M^-1）。这种结合快速且稳定，使其成为酶测定、蛋白质 - 蛋白质结合测定和分子生物学测定等各种分析中的理想选择。

产品特点

分析原理
在均相时间分辨荧光（HTRF）相互作用分析中，一部分（直接或间接）用供体进行标记，另一部分用受体进行标记（同样直接或间接）。信号强度与两部分的结合程度成正比。在此处所示的示例中：链霉亲和素 - 铽穴状化合物与生物素化的标记部分 A 结合，而B部分 * 与用 HTRF 受体标记的特异性抗体结合。* B部分也可以是生物素化、带有标签、Fc 融合的。在这些情况下，使用相应的用受体标记的 HTRF 试剂（抗标签、抗物种、蛋白 A、链霉亲和素）进行检测。

分析方案
如下示例描述了使用 20 µL 最终分析体积检测生物素化标记的A部分和未标记的 B部分* 之间相互作用的方案。分装两部分（10 µL），孵育，加入链霉亲和素 - 铽穴状化合物（5 µL）和用受体标记的抗 B部分（5 µL），孵育并读取。* B部分也可以带有标签、Fc 融合或直接标记。在这些情况下，使用相应的用供体标记的 HTRF 试剂（抗标签、抗物种、蛋白 A、链霉亲和素）进行检测。

分析细节
测试次数与活性部分有何关系？

每个孔的平均结合物数量反映了总体生物材料含量。通常优选使用活性部分的量而不是总结合物的量。对于穴状化合物和 d2 结合物，总结合物的量等于活性部分的量，因为标记的分子量可以忽略不计。对于用 XL665 标记的实体则不是这样，总结合物的量将根据 XL665 结合物的最终摩尔比而变化，但是，由 Revvity 提供的活性部分的量是恒定的，并基于订购的测试次数。

穴状化合物和 XL665 结合物的推荐用量
穴状化合物结合物不能过量，以防止读数器饱和和不可接受的背景水平。在大多数情况下，1 至 5nM 的穴状化合物浓度是合适的，并且根据所使用的与 HTRF 兼容的读数器，在 620nm 处将产生 20,000 至 80,000 cps。XL665 结合物必须尽可能与其分析对应物匹配，以便最大数量的生物分子被 XL665 受体标记。因此，要在 20nM 的分析浓度下检测标记分子，抗标签 - XL665 的浓度应是等摩尔或更高。

瑞孚迪（Revvity）是瑞孚迪生物医学（上海）有限公司旗下品牌，将“不可能”视为灵感，将“做不到”视为原动力。瑞孚迪提供健康科学解决方案、前沿技术和专业服务，业务涵盖科研探索、开发、诊断、治疗的端到端全流程。依托在转化多组学技术、生物标志物鉴定、成像、疾病的预测、筛查、检测与诊断、信息学等领域的多年深耕，瑞孚迪正以科技之能，突破人类潜能的边界。

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Q：HTRF和AlphaLISA适合如何选择？

A：HTRF和Alpha两种方法各有优势，首先确认酶标仪是否具有相应的模块，如果都具备，从实验便利性和数据呈现来看，HTRF操作更方便，但是Alpha数据表现、样本适应性上优势明显，客户根据自己需求进行选择。

Q：为什么样本稀释倍数越低，试剂盒测出的待检物质的含量反而越低？

A：按照经验来看，应该是出现hook效应了，一般用夹心法检测的话，如果样品的浓度远超过标曲的线性范围，就会出现测量结果降低的情况，需要对样品做进一步的稀释。

Q：搭配HTRF浅孔板货号？

A：96孔浅孔板：66PL96001（1个板子），66PL96005（5个板子），66PL96025（25个板子），66PL96100（100个板子）
384孔板：6008280（50个板子），6008289（200个板子）。

Q：如何查产品效期？

A：首先看说明书，如果说明书没有明确的保质期，则用产品货号在revvity官网查到该产品的页面，页面最下方有该产品的data sheet，data sheet里面有具体的保质期限。

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产品货号	产品名称	规格
610SATLB	HTRF STREPTAVIDIN-TB	20K PTS

产品特点

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