Pannarase全能核酸酶
  • 产品概述
  • 品牌简介
  • Q&A
  • 资料下载

Pannarase是一种来自于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens),经基因工程改造的核酸内切酶,能够将各种类型的DNA和RNA降解成3~5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸,又被称为“全能核酸酶”。广泛用于疫苗、细胞与基因治疗等领域的病毒纯化工艺。

产品特点

产品性质:

项目

描述

规格

10万/50万/500万 U/管

分子量

27kDa

纯度

≥99%  (SEC-HPLC)

比活性

≥2x106 U/mg

最适pH

8.0

最适温度

37°C

辅助因子

1-10 mM Mg2+

缓冲液

20 mM Tris-HCl pH 8.0, 2 mM NaCl,

2 mM MgCl2, 50% (v/v) 甘油

储存温度

-20°C,避免反复冻融

(由于甘油的存在,-20°C条件下不会冻住)

活力单位:通过测定其裂解鲱鱼精DNA底物的能力(herring Sperm DNA, Sigma,目录号D7290)一个单位Pannarase全能核酸酶活力定义为在37°C pH8.0反应条件下30分钟内导致A260nm值降低1.0(相当于完全消化37ug DNA)。

 

产品特点:

  • 杰出单位比酶活
  • 非His标签纯化
  • 质谱均一性认证
  • 无动物源(AOF)
  • 严格的指控标准、低内毒

 

SEC-HPLC:(纯度99.72%

 

尺寸排阻色谱显示高纯度,无聚集体产生

 

LC-MS检测:

 

液质联用分析蛋白分子与理论值一致,无杂质峰,结构均一

应用案例:

对质粒DNA的酶切活性

                                        对比不同品牌核酸酶的酶切效果图

                         (反应条件:20uL反应体系其中质粒DNA浓度为1mg/ml)

 

运输和保存方法:干冰运输。-15℃ ~ -25℃保存,有效期2年。

推荐使用条件:

反应条件

最适条件*

有效条件**

Mg2+

1-2 mM

1-10 mM

pH

8.0-9.2

6.0-10.0

Na+/K+浓度

0-20 mM

0-150 mM

温度

37℃

4-42℃

(Dithiothreitol)DTT

0-100 mM

0-300 mM

2-mercaptoethanol

0-100 mM

0-300 mM

PO43-

0-10 mM

0-100 mM

* “最适条件” 指的是在此条件下Pannarase 核酸酶可保持>90%的活性

** “有效条件” 指的是在此条件下Pannarase 核酸酶可保持>15%的活性

 

使用方法:

1.对于大肠杆菌破碎液

为了达到降低粘度的目的,加入核酸酶的用量须根据破碎液的菌体浓度来决定,如果菌体浓度在50%,建议加入的核酸酶的量为1:1000-5:1000,即50万-250万U/L。如果菌体浓度在5%,则可以按照1:10000-5:10000的比例加入。

2.对于细胞裂解液

可以按照106-107个细胞加入500单位核酸酶。

3.对于纯化后的腺病毒或者病毒疫苗

由于DNA含量相对较少,可以按照万分之一到万分之五也就是每毫升5个单位的最终浓度加入。

 

注意事项:

1.酶的最佳作用条件为pH 8.0–11.0,37°C,30min。

2.镁离子对酶活是必要的,推荐使用浓度为2mM,如样品中有DETA等金属螯合剂,需去除或加入过量镁离子。

3.酶活性比较稳定,室温放置短期内不会有太大影响,长时间保存需放置在-20°C冰箱内。酶用不含甘油缓冲液稀释后尽快使用,不推荐冻存后再使用。

4.对于仅为降低粘度为目的,可以直接加入核酸酶,室温缓慢搅拌30min。

 

订货信息

产品货号

产品名称

产品规格

CYG002F0010

Pannarase全能核酸酶

100,000 U

CYG002F0050

Pannarase全能核酸酶

500,000 U

CYG002F0500

Pannarase全能核酸酶

5,000,000 U

点击加载更多信息

上海逐典生物科技有限公司,坐落于上海紫竹科技园区,获得ISO9001质量体系认证,是一家专业从事重组蛋白研发和销售的高新科技企业。

×