PROTACs分子胶药物发现
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G蛋白偶联受体(GPCR)是人类基因组中最大、最多样化的蛋白质家族,迄今为止已鉴定出800多个成员。它们在细胞和生理过程中发挥着重要作用,包括细胞增殖、分化、神经传递、发育和凋亡。GPCR 位于质膜中,可识别多种不同的细胞外刺激,包括光子、离子、小分子、肽和蛋白质。其介导的信号传导通过与不同的细胞内蛋白质(例如异源三聚体 G蛋白、抑制蛋白和激酶)偶联而发生,然后激活下游效应器并触发细胞级联反应。GPCR介导的信号通路与多种人类疾病有关,目前市场上 30-40% 的药物都以 GPCR 为靶点,用于治疗包括糖尿病、心脏病、肿瘤、免疫病、精神疾病等。因此,了解 GPCR 的结构和功能对于研究细胞信号传导和分子识别的基础科学以及药物发现的应用科学都很有价值。

产品特点

一、筛选与E3 Ligase结合的分子

PROTAC通过形成靶蛋白、PROTAC和E3泛素连接酶的三元复合物来发挥作用,检测PROTAC分子与E3 泛素连接酶结合情况,可以深入研究靶蛋白的泛素化水平,这对于靶蛋白的降解至关重要。

 

瑞孚迪提供均相二元复合物检测试剂,以HTRF试剂盒为例,该类试剂盒采用竞争法,当不存在PROTAC分子时,试剂盒可以产生HTRF信号,而如果存在可以与特定E3泛素连接酶结合的PROTAC分子时,便能阻断试剂盒原来的HTRF信号。PROTAC常用的E3泛素连接酶有KEAP1、Cereblon、cIAP1、MDM2、VHL、XIAP1等,目前瑞孚迪均可提供这些连接酶的检测试剂盒。

 

产品列表(部分)

靶点

HTRF

Alpha

KEAP1

64BDKEAP1 PEG

AL31 94C

cereblon

64BDCRBNPEG

AL3147C

CIAP1  BIR2

64BDIAPB2PEG

AL3166C

MDM2

64BDMDM2PEG

AL31 68C

 

二、三元复合物的构建验证

三元复合物的形成是发挥蛋白降解功能的关键环节,高效且稳定的三元复合物形成有利于目标蛋白的泛素化和后续的降解过程。在设计PROTAC分子时,配体和linker的组合可以有很多的选择,如何提高筛选效率是一个问题。

 

瑞孚迪提供均相三元复合物检测试剂,如果PROTAC分子可以连接靶蛋白和E3形成三元复合物,便能产生HTRF信号,如果不能与靶蛋白或E3结合,便无法产生信号,该方法非常大家进行方便高效地筛选相应的PROTAC。

 

产品列表(部分)

  1. 检测靶蛋白-药物-E3 Ligase三元复合物试剂盒

货号

靶点

平台

RVMTO043-500

GSPT1/CRBN

HTRF

RVMTO026 -500

KRAS-G12C/VHL 

HTRF

RVMTO027-500

BRD4 (BD1/2)CRBN

HTRF

RVMTO030 -500

BTK-C481S/CRBN

HTRF

 

  1. ToolBox

瑞孚迪提供一系列HTRF/ALPHA标记的抗体/分子,您可选择合适的抗体/分子,用于搭建TCF、PPI等各类实验模型。

标签

HTRF

Alpha

6HIS

61 HI2KLA

AS101

61 HISDLF

 AL178

GST

61GSTKLA

6765300

61 GSTDLF

 AL1 1 0

streptavidin

61 0SADLF

6760002 

61 0SAXLF

AL1 25

 

三、胞内目标蛋白的检测

胞内靶蛋白表达水平是直接评估PROTAC和分子胶是否有效发挥其蛋白降解功能、降解效率、评估药物疗效以及进行质量控制的关键指标。瑞孚迪基于HTRF和AlphalISA均相检测技术,可提供上百种胞内蛋白检测试剂盒, 用于高效筛选靶向蛋白降解的PROTAC、分子胶等药物。

 

产品列表(部分)

  1. 转录因子相关靶点产品

靶点

HTRF

Alpha

Androgen Receptor

64ANDRPEG

ALSU-TANDR-A500

Estrogen Receptor-alpha

64ERAPEG

ALSU-TERA-A500

NRF

64NRFTPEG

ALSU TNRF2 A500

STAT3

64NT3PEG

ALSU-TST3-A-HV

 

  1. 表观相关靶点产品

靶点

HTRF

Alpha

CREBBP

64CREBBPTPEG

ALSU-TCRBP-A500

BRD2/3/4/7/9

SMARCA4

64SMARC4TPEG

ALSU-TBRG1 -A500

 

  1. 蛋白激酶、GTP相关靶点产品

靶点

HTRF

Alpha

CDK family

1/2/4/5/6/8/9/12

1/2/4/5/6/7/9/12

Wee1

64WEE1TPEG

ALSU-TWEE-A500

KRAS

64KRASTPEG

ALSU-TKRAS-A500

BTK

63ADK064PEG

ALSU-TBTK-A-HV

 

  1. 内参蛋白检测产品

内参蛋白可用于数据归一化,将目的蛋白的信号强度与内参蛋白的信号强度进行比较,从而得到更为准确的相对表达量。

靶点

HTRF

Alpha

GAPDH

64GAPDHPEG

ALSU-TGAPD-B500

Alpha-Tubulin

64ATUBPEG

-

 

四、细胞活力检测

在PROTAC和分子胶药物研究中,测量细胞活力是一个重要的步骤,因为它有助于评估药物对细胞的影响,包括药物的毒性和治疗效果。通过检测细胞内ATP含量来分析细胞活性是目前比较常用的方法,瑞孚迪基于成熟的化学发光平台,可提供四种规格的ATP检测试剂,让您更好地进行细胞活力检测。

 

产品列表(部分)

货号

名称

601 6943

ATPlite

601 6736

ATPlite 1 step

6066943

ATPlite 3D

6066736

ATPlite 1 step 3D

瑞孚迪(Revvity)是瑞孚迪生物医学(上海)有限公司旗下品牌,将“不可能”视为灵感,将“做不到”视为原动力。瑞孚迪提供健康科学解决方案、前沿技术和专业服务,业务涵盖科研探索、开发、诊断、治疗的端到端全流程。依托在转化多组学技术、生物标志物鉴定、成像、疾病的预测、筛查、检测与诊断、信息学等领域的多年深耕,瑞孚迪正以科技之能,突破人类潜能的边界。

 

2023年瑞孚迪的营业额超过27亿美元,全球拥有11,000多名员工,为制药和生物技术企业、诊断实验室、科研机构和政府机构等客户提供多样化服务。公司是标准普尔500指数的成员,客户遍及全球190多个国家和地区。

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