瑞孚迪 IVIS Lumina LT小动物活体成像——让二维光学成像更加简便

IVIS Lumina LT Series III 是 Revvity 第三代小动物活体光学二维成像平台，具有高灵敏度生物发光和荧光成像性能。该系统配备高灵敏 CCD 相机、避光成像室和全自动化的分析功能。作为全球领先的小动物活体成像平台，IVIS 系统包括一整套全球实验室认可的实用配件。

灵活、可扩展、可升级

考虑到灵活性，IVIS Lumina LT 是一种多功能系统，可以轻松容纳培养皿或微孔板进行体外研究，以及用于器官的离体成像。此外，通过 5 - 12.5 (cm) 可调节视野以及扩展镜头，可将视野范围扩展至 2.5 - 24 (cm)。利用此功能可以对五只小鼠或两只中等体型大鼠进行同时成像。同时可以进行升级，拥有增强的荧光成像功能，以提高从可见到近红外成像光谱的灵敏度。

出色的成像效果

IVIS Lumina LT 同时具备高质量的荧光和生物发光成像功能，并且滤光片能用于绿光至近红外范围的荧光成像。所有 IVIS 仪器出厂前均经过复杂且严格的光学校准，保证在同一实验条件下，使用不同仪器、不同拍摄参数所获取的成像数据的一致性及可重复性，方便不同用户间的数据验证及交流。此外，Living Image 软件结合仪器校准、背景扣除和图像算法，使用户获得高质量、可重复性的定量结果。

(1)IVIS Lumina LT 可以提供5个成像视野

图1 IVIS Lumina LT 成像系统提供5个成像视野

(2)IVIS Lumina LT 可以对同一动物进行多重光学标记成像，如下图2左是使用酶激活型荧光探针Cat B 680 FAST 用来监测 4T1-luc2 肿瘤模型中组织蛋白酶B的活性，OsteoSense 800 可以靶向骨架结构。图2右是感染后19h脑膜炎小鼠的体内和离体脑组织者图像，分别显示Lux细菌荧光素酶 (500 nm) 和GFAP-Luc 萤火虫荧光素酶 (620 nm) 信号。大部分细菌信号仅限于脑中脑脊液被困在脑室间隙（背侧）或注射部位（腹侧）的区域，而GFAP在整个大脑中被诱导且在大脑的某些区域存在不同强度的生物发光信号[1]。

图2 多重光学标记成像

(3)IVIS Lumina 活体成像在各个领域的应用十分广泛。在肿瘤分布应用，使用荧光标记方法进行肿瘤定位观察，人胃腺癌细胞系 BGC823-iRFP细胞的体外细胞形态和增殖能力与 BGC823 细胞相似，第20天，小鼠接种BGC823或BGC823- iRFP后，使用 IVIS Lumina活体成像系统进行观察。与BGC823细胞相比，BGC823-iRFP细胞在体内和离体均表现出强信号；第18天，腹腔注射BGC823-iRPF小鼠出现明显信号[2]。

图3 BGC823-iRFP体外和体内成像

在神经系统的应用，Tau是一种微管相关蛋白，主要在神经元中表达，在神经系统疾病的发病机制中起关键作用。通过使用通过基因编辑手段将将GFP的 cDNA整合到 MAPT基因的exon1中（称为 TauGFP/GFP)，使用Revvity的 IVIS Lumina活体成像系统发现在大脑、睾丸、视神经、坐骨神经和肾脏的荧光强度最大，而在脾脏、肝脏或胃中未观察到信号[3]。

图4 TauGFP/GFP小鼠肾脏中GFP的检测

专业的活体光学成像分析软件

IVIS Lumina LT 拥有最先进的图像获取及分析软件。主要特点包括具有探针库的成像向导和自动设置功能，便于扫描参数设置及批量处理，以加快数据分析。具有独特的图像算法工具用于去除组织自发噪音，提高图像质量及定量准确度。

图5绝对校准允许长时间的研究以及世界各地实验室之间的结果比较

强大的硬件配置

IVIS Lumina LT 采用背照射、背部薄化科学1级 CCD 相机可在整个可见至近红外光谱上提供高量子效率，以热电方式 (Peltier) 冷却至 -90 °C，确保了低暗电流和低噪音。具有10个激发滤光片和4个发射滤光片适用于体外、离体及表面成像。以及具有集成的气体麻醉接口可同时对5只小鼠进行持续麻醉成像。

配套活体成像试剂

Revvity 提供种类丰富的生物发光底物、生物发光肿瘤细胞株和发光细菌、荧光探针、荧光探针标记及纳米粒子标记试剂等活体成像相关试剂，可以帮助研究人员更好地了解疾病相关早期生物学变化、跟踪疾病进展、帮助指导药物发现过程以及评估候选药物的功效和安全性。

图6 不同活体成像试剂成像结果

综上，Revvity IVIS Lumina LT小动物活体成像可以实现高灵敏度生物发光二维成像、覆盖至近红外光谱波段范围的荧光成像、基于切伦科夫辐射原理的放射性同位素成像，是市场上最全面和最值得信赖的小动物活体光学成像系统。同时Revvity具有三维成像仪器、荧光探针、标签、染料等试剂，可为您提供全面的体内解决方案。

参考文献

[1] Kadurugamuwa JL, Modi K, Coquoz O, Rice B, Smith S, Contag PR, Purchio T. Reduction of astrogliosis by early treatment of pneumococcal meningitis measured by simultaneous imaging, in vivo, of the pathogen and host response. Infect Immun. 2005 Dec;73(12):7836-43. doi: 10.1128/IAI.73.12.7836-7843.2005. PMID: 16299273; PMCID: PMC1307043.

[2] Hu H, Zhang Z, Wang R, Wang Y, Jin J, Cai L, Yang J, Duan H, Wu Z, Fang Z, Liu B. BGC823 Cell Line with the Stable Expression of iRFP720 Retains Its Primary Properties with Promising Fluorescence Imaging Ability. DNA Cell Biol. 2020 May;39(5):900-908. doi: 10.1089/dna.2019.5057. Epub 2020 Feb 25. PMID: 32096664.

[3] Vallés-Saiz L, Peinado-Cahuchola R, Ávila J, Hernández F. Microtubule-associated protein tau in murine kidney: role in podocyte architecture. Cell Mol Life Sci. 2022 Jan 27;79(2):97. doi: 10.1007/s00018-021-04106-z. PMID: 35084555; PMCID: PMC8794918.