Pannarase耐高盐核酸酶 —— 高盐状态下DNA去除的明智选择

亲爱的用户，在下游纯化工艺环节中，您是否遇到过这样的问题—利用高盐洗脱的层析样品中的HCD（HostCell DNA，宿主细胞核酸）含量偏高，需要采取相应措施降低其含量。

工艺当中通常会设计在层析操作后，再添加一步核酸酶酶切来去除多余的HCD，那么另外一个问题随之而来，市面上的大多数全能核酸酶并不耐盐，高盐环境下就会失活，酶切效果大大降低。

所谓“工欲善其事，必先利其器”，上海逐典生物技术有限公司自主研发的Pannarase耐高盐核酸酶能完美实现在高盐状态下对样品中HCD的去除，降低工艺难度，提供生产效率。

Pannarase耐高盐全能核酸酶除了具备高浓度盐溶液下的耐受性（500 mM NaCl浓度下依旧能保持15%以上的有效酶活,如下图所示），同时兼具核酸酶其他该有的特性。作为一款无碱基偏好性的广谱全能核酸酶，Pannarase全能核酸酶能将所有类型的DNA和RNA降解为3~5个碱基片段，从而满足监管机构对病毒载体和疫苗中HCD残留的要求。

从工艺角度，一步核酸酶去除HCD与一步层析（或者一步超滤）去除HCD相比，核酸酶的特异性去除HCD效率更高，产品收率更高，同时保护下游层析和过滤装置不受污染，降低料液粘度。

在工艺研发中，核酸酶本身的残留也是客户非常关注的质控指标，为此，逐典推出了配套的Pannarase核酸酶ELISA检测试剂盒，以供检测使用。

本ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗PANNARASE核酸酶的单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的PANNARASE核酸酶会与酶标板上的包被抗体充分结合。

洗板后加入生物素化抗PANNARASE核酸酶抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的PANNARASE核酸酶发生特异性结合；

洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；

洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的PANNARASE核酸酶，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；

最后，在λmax=450nm （OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的PANNARASE核酸酶浓度与OD值成正比，通过四参数拟合软件绘制标准曲线便可计算出样本中PANNARASE核酸酶的浓度。

对比其他品牌的核酸酶ELISA检测试剂盒，逐典Pannarase全能核酸酶检测试剂盒的优势在于：

固相载体直接包埋单抗，抗干扰能力更强，批间一致性更好；

结合生物素化抗体，灵敏度更高；

线性范围宽广，0.15-10 ng/ml；

兼容不同品牌核酸酶的残留检测。

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