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【实验室必备技能】细胞冻存全攻略:让你的细胞“休眠”更安心!

时间:2025-03-06 来源:上海玮驰仪器有限公司 阅读:50

亲爱的科研小伙伴们,是否经常为细胞状态不稳定而焦虑?是否担心辛苦培养的细胞因意外污染全军覆没?今天带您解锁科研界的"细胞时光机"——超详细细胞冻存指南,文末更有冻存失败的6大避坑指南!

为什么说冻存是细胞房的头等大事?

✅ 建立珍贵细胞株的"备份保险箱"

✅ 避免连续传代导致的遗传漂变

✅ 应对实验室突发停电的终极预案

✅ 课题交接时最硬核的"学术遗产"

教科书级冻存操作七步曲

1️⃣ 【黄金时刻】选择对数生长期细胞

(Tips:融合度80-90%时为最佳窗口期)

2️⃣ 预冷冻存液:含10%DMSO的胎牛血清

3️⃣ 细胞消化后悬液离心(1000rpm,5min)

4️⃣ 冻存液轻柔重悬(浓度建议:5×10⁶/mL)

5️⃣ 分装冻存管(切记标注:细胞名称/代数/日期/操作者)

6️⃣ 程序性降温:4℃→-20℃→-80℃梯度冷冻

7️⃣ 最终归宿:液氮罐气相层(-196℃长期保存)

90%新手不知道的冻存黑科技

❗ 冻存管要用内部螺纹款(防液氮渗漏)

❗ 梯度降温神器:异丙醇冷冻盒比传统酒精灯更安全

❗ 复苏后存活率检测:台盼蓝染色+双荧光活死细胞检测

❗ 重要细胞株的"三重备份原则"(不同冻存批次+不同液氮罐)

冻存失败的六大"隐形杀手"

⚠️警报!冻存管从-80℃取出时冒白霜(冰晶形成警报)

⚠️ DMSO未提前预冷导致放热损伤

⚠️ 复苏时水浴温度超过40℃(37℃才是黄金温度)

⚠️ 未使用细胞专用冻存管(普通EP管会爆裂)

⚠️ 液氮罐未定期补充液氮(气相保存≠永久保存)

⚠️ 忘记做支原体检测直接冻存(小心污染全军覆没)

埃泽思生物供应多款细胞冻存液。对于常规工具细胞,以及 MSC、iPSC 等珍贵细胞,均有与之相匹配的相应冻存方案。同时,针对不同的细胞培养工艺,还能提供不同剂型、不同浓度的细胞冻存体系。全方位满足您的需求,必定能成为您产品研发之路上的绝佳助力。

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无血清细胞冻存液(治疗级)

 

 

  • 完成CDE备案, 符合CDE规定IND申报规则
  • 无需程序降温 , 冻存于-80℃冰箱后置液氮中长期保存
  • 冻存细胞复苏率均高于95%
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  • 无血清,无各类病毒和支原体等污染的可能性
  • 生产过程遵循ISO9001体系, 严格执行cGMP操作标准

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ES/iPS 细胞冻存液

 

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  • 成分确定,批次间差异小
  • 细胞复苏效率高,该冻存液冻存细胞复苏率高于血清冻存方法
  • 即用型产品,且无需程序降温可直接-80℃冰箱过夜后转移至液氮中长期保存