Simoa®文献 | 人类颈部淋巴结富含神经退行性液体生物标志物

在动物模型中，脑神经退行性生物标志物会排入颈部淋巴结 （CLN），并且引流功能会随着年龄的增长而降低。如果这发生在人类中，CLN 可能提供一种易于获得的蛋白质清除率方面的测量方法。本研究提供了在人类 CLN 中可检测到神经退行性生物标志物的第一个证据。结果显示除NFL外，所有 CLN 生物标志物浓度均显著高于血浆浓度，p-Tau181最明显，其 CLN 浓度随年龄增长而降低。CLN-血浆生物标志物比率升高表明它们在 CLN 中的浓度可能为脑清除和淋巴引流提供了一个独特的测量方式，可能适用于衰老研究和未来的临床试验。

期刊：Brain 2024年10月

牛津大学 精神病学系

瑞典哥德堡大学

研究背景

神经退行性疾病的特征是异常蛋白质在大脑中积累。阿尔茨海默病的病理标志是 β 淀粉样蛋白斑块和高度磷酸化的tau缠结。这些神经退行性生物标志物可以在脑脊液和血液中测量，为阿尔茨海默病和其他痴呆症的病理生理学以及临床诊断、预后和监测提供有价值的见解。了解这些蛋白质如何从中枢进入外周系统，可能是评估痴呆症患者大脑清除能力受损的关键。最近发现淋巴和脑膜淋巴管系统是脑脊液大分子从大脑向外周外排的候选者。在小鼠体内追踪 CSF 注射的分子，以及在人类中进行造影剂研究表明，这种脑膜淋巴流出物直接排入CLN。上游淋巴外流的破坏可以加速脑 Aβ 斑块的形成。由于CLN 是颅外的，而且可能是该引流系统中的会聚枢纽。因此，我们预测人类 CLN 采样可以更好的模拟和监视脑内标志物的变化。

研究方法

文章在两个人群中使用simoa测量了通过超声引导细针穿刺（FNA）获得的CLN 抽吸物和血浆Aβ 40, 42、p-Tau181、GFAP和NFL的浓度。

i）25名自身免疫患者的发现队列

ii）四名健康志愿者的血浆、CLN和毛细血管血的优化队列。

研究结果

1．在发现队列中，所有 5 种生物标志物都存在于所有 CLN 样本中，但 NfL 只在部分样本中存在（图 1A-B）。校正后的 Aβ40 、 Aβ42 和 pTau181 CLN 浓度显著高于血浆。对于 pTau181，差异幅度最大，CLN中浓度是血浆的65倍。GFAP 和 NfL 未观察到显著差异。

在所有 CLN 上清液和所有四名健康参与者的配对血浆中均可检测到所有生物标志物（图 1C-D）。与血浆相比，所有 CLN 样本均显示更高的 Aβ40 、 Aβ42 、 pTau181 和 GFAP 浓度，以及与毛细血管血中相比，CLN的Aβ40、pTau181 和 GFAP更高。

图 1 血浆中校正的痴呆液体生物标志物浓度与毛细血管和颈部淋巴结上清液的比较

2. 在动物模型中，随着年龄的增长，AD 病理相关蛋白向 CLN 的淋巴引流较少。为了在人类中探索这一假设，我们观察到血浆 pTau181 与年龄呈正相关，但 CLN 水平显示 pTau181 与年龄呈负相关（图 2）。

图 2 颈部淋巴结和血浆p-Tau181浓度与年龄的关系

结论

结果表明，CLN 抽吸物含有目前用作神经退行性生物标志物的蛋白质的浓缩水平。鉴于大脑和 CLN 之间的直接和密切联系，认为 CLN可能代表脑引流相关物质的来源。FNA 方法由放射科医生专家进行，并被证明安全又微创，与广泛使用的腰椎穿刺脑脊液采样做法相比具有优势。CLN生物标志物水平也显示出比血液更高的浓度，并且不受外周组织的污染。因此我们建议 CLN 采样可以成为一种有价值的补充研究工具，以研究健康和疾病中蛋白质从大脑到外的周清除情况，包括在神经退行性疾病的研究中。

总之，文章提供了独立验证的证据来支持 CLN 中存在痴呆液体生物标志物，除 NfL 外，其水平明显高于循环血浆。此外文章在人类中提供了第一个证据表明，随着疾病相关生物标志物 pTau181 的年龄增长，脑淋巴引流减少。综上所述，这些观察结果可能反映了纵向量化 CLN脑部疾病生物标志物反应体内淋巴引流的潜力，并且在人类实验医学研究和早期临床试验中评估脑蛋白清除率可能具有重要价值。

文章的局限性包括我们的优化队列中的人数少、各种自身免疫性神经系统疾病的潜在混淆以及样品制备的差异。