不是所有TR-FRET，都是HTRF 202408

作为均相分析技术，TR-FRET技术已经成为药物研发领域重要的检测手段。本文将从TR-FRET的原理、特点及HTRF技术优势和应用领域做一个简单的介绍。

TR-FRET 介绍

TR-FRET是TRF（Time-Resolved Fluorescence，时间分辨荧光）和FRET（Fluorescence Resonance Energy Transfer，荧光共振能量转移）技术的综合。

TRF技术是利用镧系元素的荧光发射时间长的特性，通过延迟检测的方式降低背景噪音的检测方法。

HTRF 延迟检测原理

FRET技术是当供体荧光分子的发射光谱和受体荧光分子的激发光谱重叠的时候，可以将供体分子的能量共振转移到受体分子上的技术。

与其它免疫检测技术（以ELISA为代表）相比较，TR-FRET的特点：

免洗，操作简便

数据稳定性好

数据背景值低

易于自动化操作

目前市场上，HTRF和LANCE Ultra等技术都属于生命科学领域比较成熟的TR-FRET技术，HTRF以其出色的稳定性更是赢得了广泛的应用。

HTRF介绍及其特点

HTRF（Homogeneous Time-Resolved Fluorescence，均相时间分辨荧光）是法国Cisbio公司（已被美国PerkinElmer公司收购，试剂业务现更名为Revvity）于1990年代研发的基于免疫荧光检测的技术。Cisbio公司已经获得HTRF的商标专利。

Cisbio公司

与市场上其它TR-FRET相比，HTRF技术及其产品拥有独特的产品优势：

1

技术特点独特

首先，在HTRF技术的供体设计中，科研人员将镧系元素锁定在专利的穴状化合物（Cryptate）内。该穴状化合物结构非常稳定，对温度、光线、pH值、二价金属离子等均不敏感，避免了环境因素对供体镧系元素稳定性的影响。

其次，HTRF技术根据蛋白结构及相互作用的特点，提供两种Donor（Eu和Tb）和两种Acceptor（XL665和d2），选用优化的供体和受体组合，使得FRET中能量转移更加有效。

Donor 稳定性比较（HTRF vs 其他TR-FRET）

想了解HTRF技术的稳定性，可以参考：

解密HTRF的高稳定性

2

研发实力雄厚

从1990年代开始，Cisbio公司就专注于HTRF技术的开发和研究，选用最适合HTRF的抗体和供体、受体分子，并根据客户的实验反馈，及时对试剂盒和工具系列进行不断优化和升级，使HTRF产品系列更加稳定可靠。

3

产品系列丰富

HTRF系列产品覆盖了大部分的药物发现领域，从早期的GPCR领域研究和激酶研究到生物标记物检测、细胞因子检测、信号通路检测、Toolbox工具系列以及Tag-Lite系列检测。

各领域的检测方案（简介见后文）

4

技术支持专业

HTRF技术2009年进入中国以来，已经成为药物发现领域重要的检测手段，为中国创新药物的发展提供了不可或缺的解决方案。公司除了对HTRF技术的各个应用领域提供详尽的操作指南之外，还会定期发布新产品，支持最新的药物研发需求，并有专业的技术团队对客户实验中遇到的问题进行解答和答疑。

北京径元是Revvity公司的试剂授权经销商。我们熟悉HTRF技术及其应用领域，并举办了多场关于HTRF技术的学术讲座，同时，我们与国内知名研发企业和科研单位保持着密切的交流和沟通。

HTRF技术应用领域简介

1

GPCR研究的完整解决方案

HTRF技术提供cAMP（Gs、Gi）、IP-One（Gq）、GTP-binding、受体配体结合（Tag-Lite）、β-arrestin、胞内信号分子等完整的检测方案。

详情请见：

GPCR检测的完整解决方案

2激酶筛选研究

HTRF技术提供TK和STK激酶的检测试剂盒，并对277种激酶提供明确的检测方案和实验优化条件。

详情请见：

基于HTRF技术的激酶检测方法

3Toolbox工具

HTRF技术提供多种标签抗体，用于蛋白互作和药物研发阶段中自行设计药物筛选方案。

HTRF PPI Toolbox 产品列表

如果需要进行HTRF技术的PPI实验设计，可以参考以下文章：

HTRF PPI 实验条件的优化

HTRF技术PPI实验案例分享 多样性

HTRF技术PPI实验案例分享 分子大小篇

HTRF技术PPI实验案例分享 亲和力篇

也可以咨询北京径元来协助构建PPI的实验设计。

4细胞因子检测

HTRF细胞因子检测试剂盒覆盖主流的因子，详情可以参考官网http://www.revvity.cn来查询。

细胞因子检测方法操作简单，更适于高通量检测。

HTRF 细胞因子检测基本操作流程

如果您对HTRF技术的细胞因子检测感兴趣，可以参考以下小文章：

细胞因子检测 - HTRF&AlphaLisa技术

HTRF技术检测新鲜血液样品中的细胞因子

不同亚型免疫细胞参与免疫进程的HTRF解决方案

5信号通路检测

HTRF信号通路检测试剂盒覆盖大部分的信号通路分子，详情可以参考官网http://www.revvity.cn来查询。

信号通路检测分为两步，细胞处理和信号检测。一般情况，2个小时就可以完成量化稳定的信号分子检测，而且比WB更简便、更省时。

HTRF 信号分子检测基本操作流程