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内毒素检测(凝胶法)的原理及详细步骤!

时间:2023-11-13 来源:上海玮驰仪器有限公司 阅读:1563

一,内毒素检测(凝胶法)的原理

酶原 内毒素 凝固酶

凝固原 凝固酶 凝固素

革兰氏阴性细菌内毒素催化了LAL中酶原的活化。初始活化速率由内毒素的浓度决定。活化后的酶(凝固酶)水解了也存在于LAL中的凝血蛋白(凝固原)内的特定化合键。水解后,产生的凝固素自行联合,并形成凝胶状胶块。

凝胶法是一种用于革兰氏阴性细菌内毒素的限量测试。凝胶法在37℃的水浴或干燥热块中放置的试管中操作。孵育一小时后,将试管翻转180°。凝块牢固地附着在试管底部,表明是阳性反应。如果液体从试管侧面向下流动,则结果是内毒素阴性。

二,检测所需主要设备及材料

试剂

– 鲎试剂(LAL)(PYROGENT™ 试剂)

– 内毒素工作标准品(CSE)

– LAL 试剂检查用水(LRW)(# W50-640, W50-100, W50-500)

器具

– 玻璃稀释管,13 × 100 mm(# N207)

– 玻璃反应管,10 × 75 mm(# N201, N205)

– 独立包装的血清吸管(选购)

– 标签

请使用经内毒素试验验证合格的无热原器具。

设备

– 加热块或非循环热水浴

– 移液器

– 计时器

– 漩涡混合器

– 试管架

三,操作步骤

本指南分步描述了如何进行传统凝胶法 鲎试剂(以下简称LAL)试验。试验开始前,先使试剂瓶温度与室温相同。

四,注意事项

– 使用配套的LAL和CSE 试剂

– 建议勿使用塑胶管稀释内毒素

– 遵循所有关于内毒素漩涡震荡次数的建议

– 使用经内毒素试验验证合格的无热原器具

– 使用前,先使试剂温度与室温保持相同

– 不要对LAL进行漩涡震荡

– 不要污染样品、标准品、LRW 和器具

– 应正确安装、验证并维护设备仪器,避免影响凝胶形成

五,玮驰相关产品

 

凝胶法LAL试剂盒
品牌 货号 名称 规格 灵敏度(EU/ml)
Lonza N283-06 PYROGENT™+凝胶法LAL试剂盒(有内毒素) 64次测试 0.06
Lonza N283-125 PYROGENT™+凝胶法LAL试剂盒(有内毒素) 64次测试 0.125
Lonza N294-03 PYROGENT™+凝胶法LAL试剂盒(有内毒素) 200次测试 0.03
Lonza N294-06 PYROGENT™+凝胶法LAL试剂盒(有内毒素) 200次测试 0.06
Lonza N294-125 PYROGENT™+凝胶法LAL试剂盒(有内毒素) 200次测试 0.125
LAL试剂检查用水
品牌 货号 名称 规格
Lonza W50-640 LAL试剂检查用水 <0.005 EU/mL,30 ml/瓶
Lonza W50-100 LAL试剂检查用水 <0.005 EU/mL,100 ml/瓶
Lonza W50-500 LAL试剂检查用水 <0.005 EU/mL,500 ml/瓶
Lonza W50-1000 LAL试剂检查用水 <0.005 EU/mL,1000 ml/瓶

 

无热原试管
品牌 货号 名称 规格
Lonza N207 无热原试管 30/铝箔包
Lonza N201 无热原试管 50/箱
Lonza N205 无热原试管 50/铝箔包
吸头
品牌 货号 名称 规格
Lonza BE25-415 Eppendorf® 2-200μl Biopur™ 移液管吸头 <0.001 EU/mL,5个托盘/pkg;96个吸头/托盘
Lonza BE25-417 Eppendorf® 50-1000μl Biopur™ 移液管吸头 <0.001 EU/mL,5个托盘/pkg;96个吸头/托盘