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“哎,这次细胞活率太差了吧!”
“怎么会这么少?是细胞计数仪不准还是细胞被污染了?”
“妈呀,细胞融合度都接近100%了,赶紧冻掉。”
“天啊,冻存管爆管啦!细胞液溅的到处都是!
如果您解冻的细胞出现上述情况时,那就要格外注意了!
实际上,细胞的冻存与解冻是两个关键的工艺过程,彼此间又是反向过程,它们直接决定了最终细胞样本的活率及传代的效果,关键是要把握好缓“冻”速“融”!
一、那么细胞如何冻? 怎么冻?
如果直接放到-80℃冰箱或者-196℃液氮里冻存的话,那么最终收获的细胞几乎“伤亡殆尽”说成”全军覆没“亦不为过。早期,细胞冻存前需要采用异丙醇程序降温盒,因为其在-80℃冰箱中存放后,可以实现-1℃/分钟的降温速率,但是由于异丙醇存在刺激性气味,长期使用存在泄露危险,对人体健康危害颇多,该方法目前基本被淘汰。
另一种泡沫材质的程序降温盒,最早由美国Biocision公司开发,通过结构设计及冷气流通原理实现梯度降温,但这也限制了降温速率,不同剂量、不同配比、不同种类的细胞,尤其那些对温度变化敏感的细胞,应该采用不同的降温曲线,随着生命技术行业快速发展,程序降温盒这种非智能化降温工具正被高科技设备所替代。
细胞的梯度降温应采用可变温控制的程序降温仪,在符合GMP要求下,需要对降温工艺数据曲线可以报告形式打印输出,且可对批次记录进行后续的审计追踪。
A. 通过控制气相状态液氮添加量来实现细胞样本的梯度降温,这一类相关设备在生物制药行业普遍使用,可直接将样本降到-130℃以下的深低温条件。CBS 2101型程序降温仪,就是采用这一原理对细胞样本进行梯度降温。
通过集成的PC电脑端将降温工艺参数输入到配套的软件中,内置温度传感系统,软件与硬件相结合控制着腔体内的生物样本降温!30L的存储空间,可以实现数百支冻存管样本预冷效果,亦可以提供更大尺寸容量的降温设备!
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