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玮驰课堂丨Lonza案例研究：通过X-VIVO培养基改善患者T细胞的扩增

时间：2022-06-16 来源：上海玮驰仪器有限公司 阅读：850

随着越来越多的CAR-T疗法批准上市，CAR-T生产工艺仍然面临很多挑战。起始材料复杂性就是其中很大的一点，接受CAR-T治疗的患者之前可能接受过放疗或化疗，而这会导致他们的细胞处在功能低下、不健康的状态。

 

如何从复杂的原材料起始又能稳定收获高质量的细胞，我们认为在培养基的选择上是至关重要的。

 

这项实验比较了市面上的4种培养基，在IL-2和CD3/28刺激下培养PBMC。

 

CFSE荧光染料检测淋巴细胞增殖

图1：在X-VIVO、 A、T、O 培养基中培养4天的T细胞增殖比较。细胞增殖表现为细胞+培养基对照组的CFSE倍数变化。Donor=3

从比较中可以看出X-VIVO和 A培养基可以支持更好的细胞扩增。但细胞数量不是唯一的评判指标。科学家们发现，T细胞表型是治疗效果的重要指标，通过观察特定的细胞表面标记物，可以帮助选择对治疗有效的细胞亚群。CD45RO+ T细胞浸润与总生存率（OS）和无病生存率（DFS）的改善显著相关。

 

第0天和第4天的CD45RA和CD45RO亚型占总T细胞群的百分比

图2：在X-VIVO、A、T、O 培养基中培养4天后活力变化，并通过FACS表型分析评估PBMC（T细胞）的分化。Donor=3

 

T细胞在培养早期自然会经历生存能力下降，这就是为什么大多数过程必须超过7-10天。X-VIVO可以提高初始阶段的细胞活率缩短培养过程，并让收获的细胞拥有更好表型。

 

这项研究表明，在市场上的标准无血清培养基中，X-VIVO培养基的性能优于竞争对手，即增殖周期较短，并收获更多的CD45RO+T细胞用于CAR-T治疗。

 

 

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