Simoa® 文献 | Extracellular Vesicles (EV)应用方向最新文献分享

自2016年起，Simoa®在细胞外囊泡领域共有50余篇文献发表。本次，Quanterix团队为您整理了其中6篇发表于2024年的文献供您参考阅读。

第1篇

Measuring EGFr on extracellular vesicles in human plasma samples

几乎所有类型的细胞均会分泌细胞外囊泡（EV）到胞外，起到细胞间通讯的关键作用，并已成为疾病进展的有价值的指标。它们在癌症诊断和监测方面的潜力尤其重要。表皮生长因子受体 (EGFr) 是多种癌症的主要驱动因素，也是癌症治疗的重要靶点或共同靶点。本研究的目的是开发一种直接在血浆样本中测量 EV 上 EGFr 的测定方法。此外还开发了三种测定法来测量血浆 EV 的总浓度。

由于EV 上预期的 EGFr 浓度较低，采用单分子阵列 (Simoa®) 技术开发了免疫测定法，与传统免疫测定方法相比，该技术的灵敏度提高了 1000 倍。使用市售的校准材料和针对表面标记物（EGFr、CD9、CD63 和 CD81）的抗体开发四种测定法：CD81-EGFr、CD81-CD9、CD81-CD63 和 CD9-CD63。来自健康个体 (n=13) 和各种癌症患者 (n=30，肺癌、结直肠癌、卵巢癌) 的小群体血浆样本用于开发、验证和测试。文章对每种测定方法均针对 EV 的稀释线性、检测限、分析变异和分析前稳定性进行了测试。与健康个体（中位数：663×106 EV EGFr/mL）相比，癌症患者 EV 上的 EGFr 较低（中位数：489 × 106 EV EGFr/mL）。相反，与健康个体相比，癌症患者血浆中的总 EV 浓度明显较高（CD81-CD9：9157 vs 4088，CD81-CD63：3634 vs 1582，CD9-CD63：9538 vs 1210，中位值 x106 EV/mL）。总 EV 测定之间观察到正相关（r=0.6，p<0.0001）。本研究所开发的检测方法可以测量人血浆样本中 EV 上的 EGFr 和总 EV，与健康个体相比，癌症患者的 EV 总浓度大幅增加。这些检测现已准备好使用大量癌症样本进行全面验证。

文章链接：

https://aacrjournals.org/cancerres/article/84/6_Supplement/3630/737195/Abstract-3630-Measuring-EGFr-on-extracellular

第2篇

Specific binding of Alzheimer’s Aβ

peptides to extracellular vesicles

阿尔茨海默病 (AD) 是 65 岁及以上成年人的第五大死因，但人们对这种疾病的发病和进展知之甚少。众所周知，淀粉样蛋白（Aβ42）的存在决定了人们何时处于AD连续体。有趣的是，随着AD的进展，血浆中可检测到的 Aβ42 减少，这种现象被认为是由Aβ在大脑中聚集得更多，并且通过CSF从大脑转运到血液导致。我们认为细胞外囊泡（EV）在这种运输中发挥作用。 EV存在于血液、尿液和脑脊液等体液中，并携带多种生物活性分子“货物”（例如蛋白质、核酸、脂质、代谢物），动态反映分泌EV的细胞的变化。

在这项工作中，为了确定 Aβ42 和 Aβ40 淀粉样肽是否EV特异性结合，我们首先对血浆分离的囊泡进行了表征，以确认它们是 EV。在确认我们从血浆中分离出EV后，我们将它们与Aβ42或Aβ40一起孵育，然后使用单分子阵列 (SIMOA®) 对其进行分析。为了确定Aβ肽和EV之间相互作用的分子特异性和热力学性质，我们通过等温滴定量热法 (ITC) 和 SIMO分析了Aβ肽和具有相同氨基酸组成但随机序列的肽的结合。在基于滴定的方法中使用ITC揭示Aβ40或Aβ42与EV的饱和结合，并且 SIMOA® 测量证实。结果表明，Aβ与EV的相互作用比之前理解的更特异，这表明Aβ和EV相互作用在正常和病理条件下（如 AD）下都具有生理作用，并且这种与 EV 相关的淀粉样蛋白具有作为 EV 相关淀粉样蛋白的AD生物标志物的潜在效用。

文章链接：

https://www.mdpi.com/1422-0067/25/7/3703

第3篇

Comparison of plasma soluble and extracellular vesicles-associated 2 biomarkers in Alzheimer's Disease patients and

cognitively normal individuals

β 淀粉样蛋白 (Aβ) 和 tau 蛋白是阿尔茨海默病 (AD) 的大脑标志，也作为可溶性生物标志物存在于血液中或封装在细胞外囊泡 (EV) 中。我们的目标是评估 AD 病理学的可溶性血浆生物标志物与 EV 的数量和含量的相关性。

方法：Simoa®测定对一组APOE ε4– 和APOE ε4+ 认知正常个体 (CN) 和 AD 患者的血浆样本和神经源性 EV (NDEV) 中的Aβ42/40和tau 进行定量。

结果：与CN个体相比，AD患者的可溶性血浆 Aβ42/40比率降低。各组之间血浆NDEV的数量和含量（Aβ40、Aβ42、tau）相似。仅在CN个体中，可溶性生物标志物的数量与NDEV数量呈负相关。

结论：可溶性 Aβ42/40比率是最稳健的AD血浆生物标志物。 NDEV及其内容物的分析指出了AD中 Aβ释放的特殊机制。

文章链接：

https://www.researchgate.net/publication/378537840_Comparison_of_plasma_soluble_and_extracellular_vesicles-associated_biomarkers_in_Alzheimer's_Disease_patients_and_cognitively_normal_individuals

第4篇

Endo-lysosomal dysfunction in neurodegenerative diseases: opinion on current progress and future direction in the use of exosomes as biomarkers

在过去的二十年中，越来越多的研究强调了内体运输缺陷与神经变性之间的联系。内溶酶体网络是一个重要、复杂的细胞系统，专门负责蛋白质、脂质和其他代谢物的运输，对细胞稳态至关重要。该通路的破坏与多种神经退行性疾病有关，包括阿尔茨海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化症、亨廷顿病和额颞叶痴呆。此外，有强有力的证据表明该途径的缺陷为诊断和治疗干预创造了机会。在这篇评论文章中，我们简要阐述了内溶酶体功能障碍在五种神经退行性疾病中的作用，并讨论了未来的研究如何研究这种细胞内途径，包括细胞外囊泡，特别关注外泌体，以鉴定新的疾病生物标志物。本文是“了解神经变性中的内溶酶体网络”讨论会议的一部分。

文章链接：

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38368936/

第5篇

Exosome subpopulations: the isolation and the functions in diseases

外泌体是细胞分泌的纳米级细胞外囊泡。外泌体通过释放其生物活性内容物（例如 DNA、RNA、脂质、蛋白质和代谢物）来介导细胞间通讯。外泌体的成分受外泌体产生细胞的调节。由于其来源不同，外泌体在大小、内容和功能上具有高度异质性。根据这些特征，外泌体可以分为具有不同功能的多个亚群。外泌体特定亚群的有效富集有助于研究其生物学功能。因此，已经开发了多种技术来分离外泌体的特定亚群。在本综述中系统介绍了分离不同外泌体亚群的新兴新技术，并总结了特定外泌体亚群在疾病，特别是肿瘤发生和进展中的关键作用。

文章链接：

https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0378111923007461?via%3Dihub

第6篇

Ultrasensitive and high-resolution protein spatially decoding framework for tumor

extracellular vesicles

位于肿瘤来源的细胞外囊泡 (EV) 表面或管腔内的蛋白质在癌症进展中发挥着独特的作用。然而，由于现有蛋白质检测方法的灵敏度有限和EV分离技术效率低下，EV内蛋白质定量受到了阻碍。在这项研究中，提出了 eSimoa 框架，这是一种创新方法，能够以无与伦比的灵敏度和特异性对EV蛋白生物标志物进行空间解码。使用此法，可以释放并测量RAS或KRAS G12D 蛋白的绝对浓度，揭示它们在胰腺肿瘤来源的EV中的普遍性，实现了低丰度 EV 亚群的绝对蛋白质浓度定量检测。 eSimoa 检测 PBS 和血浆样本中的EV，证实了它们在不同临床样本类型中的适用性。总体而言，eSimoa 框架提供了一个有价值的工具，可以 (1) 检测血浆中浓度低至 105 EV /mL的EV，(2) 量化低至 fM 的绝对EV蛋白浓度，以及 (3) 解码EV蛋白。这项研究强调了eSimoa在以最少的预纯化方式识别临床样本中疾病特异性 EV 蛋白生物标志物方面的潜力，从而推动临床转化的进步。