论文分享｜Revvity LabChip GXII微流控蛋白电泳在双抗检测中的应用

双抗相比于单抗，双抗的表达过程会存在很多副产物，如半抗体、3/4抗体、同源二聚体、轻链缺失、单臂缺失及聚集体等，这些副产物的存在会严重干扰双抗的有效性以及安全性。

药明康德发表了pH-盐双梯度洗脱法在MMC ImpRes混合模式层析纯化基于WuXiBody双特异性抗体的应用，该论文使用LabChip GXII Touch HT仪器用于非还原CE-SDS分析。

WuXiBody是由药明康德开发的新型双特异性抗体（bsAb）。它的关键特征是用T细胞受体（TCR）恒定域取代了一个亲本mAb的CH1 / CL恒定区，该设计旨在促进同源重链（HC）-轻链（LC）配对。

下面我们一起来看看 LabChip 在双抗纯化检测中发挥了什么作用呢？

检测流程

LabChip GXII Touch HT用于非还原CE-SDS分析，所用芯片是Express。

蛋白质样品、标准、空白和Ladder在70℃加热10 min，然后上机LabChip GXII Touch HT 进行分析（每个run用2 μg样品）。

结果展示

Protein A洗脱液，经LabChip分析非还原CE-SDS。半抗体占16.7%，单臂缺失占1.8%，轻链缺失占8.5%。

MMC ImpRes洗脱液的纯度达到98.1%，与Protein A洗脱液，副产物A、B和C的百分比分别从16.7%、1.8%和8.5%下降到0.3%、0.6%和0.4%。

如下表所示，非还原的CE-SDS和SEC-HPLC分析进一步表明，MMC ImpRes洗脱液的纯度分别为98.1%和98.8%。

总结

在这项工作中，作者证明了在pH-盐双梯度洗脱下进行的MMC混合层析比在pH/盐单洗脱下提供了更高的分辨率梯度洗脱，有效地去除单梯度洗脱不能去除的副产物，LabChip GXII Touch HT助力非还原CE-SDS分析。