有问有答｜为您答疑解惑Lonza电转

Q

Nucleofector技术的基本原理是什么？

A

Nucleofector技术用于原代细胞和难以转染的细胞系。这是一种基于电转参数和细胞类型特异性试剂盒的非病毒转染方法。使用Nucleofector技术，DNA直接进入细胞核，对于其他底物（如蛋白质、siRNA或miRNA等）Nucleofector技术也能够提供高效、稳健的转染，同时保持高细胞活力。

Q

为什么Nucleofector技术是瞬时蛋白质生产的理想选择？

A

对于许多悬浮细胞系，特别是CHO，常规转染方法的效率非常有限。

对于蛋白质生产，悬浮细胞比贴壁细胞更受青睐，因为它们更容易培养。与传统的转染方法不同，Nucleofector技术为与蛋白质生产相关的悬浮细胞系（包括CHO和HEK293）提供了优异的转染效率和活性，有助于在几天内产生毫克量。

Q

为什么Nucleofector技术是稳定克隆生产蛋白质的理想选择？

A

由于筛选程序和转染后对无血清条件的适应，稳定克隆的产生通常需要六个月或更长时间。在Nucleofector技术的帮助下，悬浮细胞可以在无血清环境中直接转染，这有助于显著缩短时间。

Q

为什么Nucleofector技术是原代细胞和难以转染细胞系的理想选择？

A

Nucleofector技术可将DNA直接转移到细胞核，这使得基因表达不依赖于细胞分裂。因此，该技术是原代细胞，甚至是神经元等非分裂细胞转染的理想工具。在细胞系和原代细胞中，在转染后不久产生基因表达，并且在许多情况下，可以在2-4小时内检测到超过50%的转染效率。

Q

试剂盒中阳性对照pmaxGFP质粒表达的GFP蛋白的分子量（MW）是多少？

A

分子量约为27kDa。

Q

为了使Nucleofector技术发挥作用，需要进行哪些优化？

A

不需要进行过多优化。因为Lonza提供特定细胞类型的转染试剂和优化的电参数。这些已经在Nucleofector设备中预先编程。此外，我们的优化方案还为您提供了有关细胞培养和处理的建议，以获得最佳转染结果。您可以在Lonza官网中找到有关您感兴趣的细胞类型的详细电转相关信息。

Q

当感兴趣的细胞没有可用的优化protocol时，该怎么办？

A

Lonza不断为越来越多的原代细胞和细胞系开发新的优化试剂盒和方案。要获取最新信息，请查看龙沙的网站或联系我们。

以上就是Lonza电转实验答疑解惑第一弹，后续小编将陆续推出更多，希望能帮助各位科研工作者拿捏电转实验！

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