Lonza内毒素检测解决方案

对于制药或生物医学相关方向的同学来说，热源污染即细菌内毒素污染是一个令人头疼得问题。

本篇本着“热爱生活，防毒避绿”的原则为各位小主们献上内毒素检测指南。

假如生活欺骗了你, 内毒素绿了你，不要悲伤, 不要心急! 忧郁的日子里须要镇静, 相信吧, 今天献上的防毒避绿指南将是你绿环阴影下的那缕光~

说到内毒素，大家都谁知道，药典明文又规定，化学药品的注射剂及原 料药、疫苗、血液制品以及注射用辅料等，只要涉及到注射、植入，并标榜“无菌、无热源”的，就得过内毒素检测（中国药典9251）的关。当然以上这些大家都知道，不再做赘述。

一，那么现行的内毒素检测方法有哪些呢？

中国药典 2020 年版中收载了包括家兔、凝胶法、光度法、重组C因子等4大类检查方法，以及近年来比较受关注的微量凝胶法，下面对各类方法进行了对比：

这么多方法，怎么选呢？选择困难症怎么办？不捉急，玮驰有lonza的针对各类中国科研小主们需求定制的数套内毒素检测方案供大家选择，检测更灵敏、应用更成熟，直接对号入座吧：

二，动态显色法：

产品：Kinetic-QCL™ Kinetic Chromogenic LAL Assay （动态显色法）
•检测方法一动态检测颜色变化
•最大灵敏度一0.005EU/mL
•仪器一带温控的酶标仪（405nm）

•反应时间一1小时左右，视样品内毒素限值而定

优势：
• Lonza最灵敏的内毒素检测方法

•抗干扰能力强，抵抗各种抑制性分子
•尤其是生物制品如疫苗、抗生素等的理想选择。

三，动态浊色法：

产品：PYROGENT™-5000 Kinetic Turbidimetric LAL Assay （动态浊度法）

•检测方法一动态检测浊度变化

•最大灵敏度一0.01EU/mL

•仪器一带温控的酶标仪（340nm）

•反应时间一1小时左右，视样品内毒素限值而定

优势：水样品和大容量注射液体检测更经济。

四，凝胶法：

产品:PYROGENT™ Plus Gel Clot LAL Assay （凝胶法）

•检测方法一肉眼观察凝胶的形成

•最大灵敏度一0.03EU/mL

•仪器一水浴锅或金属浴

,反应时间一1小时

优势:

•方法简单，不需要复杂的仪器和软件

•成本低

Lonza内毒素无论是从均一性，还是从性状等维度都经过太多的高分文献的验证，下面总结了若干条高分文献以供大家参考使用。

[1] Ong K G, Leland J M, Zeng K, et al. A rapid highly-sensitive endotoxin detection system [J]. Biosens Bioelectron, 2006, 21(12): 2270-2274.

[2] Su W, Ding X. Methods of Endotoxin Detection [J]. J Lab Autom. 2015, 20(4): 354-364.

[3]: 裴宇盛, 蔡彤, 高华. 细菌内毒素检查新方法进展 [J]. 药物分析杂志, 2014, 34(3): 392-395.

[4]:裴宇盛, 蔡 彤, 陈 晨, 等. 重组 C 因子法检测福沙匹坦二葡甲胺中细菌内毒素的方法学研究 [J]. 中国现代应用药学, 2019, 36(1): 1-4.

[5]:Burkhardt M, LopezAcosta A, Reiter K, et al. Purification of soluble CD14 fusion proteins and use in an electrochemiluminescent assay for lipopolysaccharide binding [J]. Protein Expression Purif, 2007, 51(1): 96-101

[6]:Yeo T Y, Choi J S, Lee B K, et al. Electrochemical endotoxin sensors based on TLR4/MD-2 complexes immobilized on gold electrodes [J]. Biosens Bioelectron, 2011, 28(1): 139-145.

[7]:Hreniak A, Maruszewski K, Rybka J, et al. A luminescence endotoxin biosensor prepared by the sol-gel method [J]. Opt Mater (Amsterdam, Neth) 2004, 26(2): 141-144.

[8]: Pallarola D, Battaglini F. Surfactant-assisted lipopolysaccharide conjugation employing a cyanopyridinium agent and its application to a competitive assay [J]. Anal Chem, 2009, 81(10): 3824-3829.

[9] Priano G, Pallarola D, Battaglini F. Endotoxin detection in a competitive electrochemical assay: synthesis of a
suitable endotoxin conjugate [J]. Anal Biochem, 2007, 362(1): 108-116.

[10] Priano G, Battaglini F. Use of an antimicrobial protein for endotoxin detection in a competitive electrochemical assay [J]. Anal Chem, 2005, 77(15): 4976-4984.

[11] Oliveira M D L, Andrade C A, Correia M T, et al. Impedimetric biosensor based on self-assembled hybrid cystein-gold nanoparticles and CramoLL lectin for bacterial lipopolysaccharide recognition [J]. J Colloid Interface Sci, 2011, 362(1): 194-201.