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数据说话：LV PRO如何重塑非病毒大体积T细胞工程化流程

时间：2025-08-01 来源：上海玮驰仪器有限公司 阅读：174

在细胞与基因治疗（CGT）迈向产业化的今天，如何在不依赖病毒载体的前提下，高效递送复杂构建体，成为工艺开发中的关键挑战。Lonza最新发布的4D-Nucleofector® LV PRO模块，正是为此而生。

非病毒递送的“放大难题”

正在被解决

传统电转系统在小体积（如20μL或100μL）下表现良好，但一旦放大至临床所需的10亿级T细胞，效率、活性和一致性往往难以维持。LV PRO通过两种全新耗材——2mL固定体积加样盒（FV）与20mL流通式加样盒（FT），实现了从微量到大体积的无缝扩展。

关键数据

在20μg/mL mRNA或12μg/mL质粒DNA条件下，LV PRO在2mL和20mL体积中均实现了与100μL参考组相当的转染效率（GFP+细胞比例）

细胞活性在转染后24小时仍保持>90%

CRISPR编辑：

效率与一致性的双重突破

在多个供体的实验中，LV PRO在CRISPR敲除（TRAC KO）与敲入（RAB11A-GFP KI）中均展现出卓越性能：

敲入效率：在7位供体、13组实验中，LV PRO的敲入效率与100μL参考组一致，且在不同电转程序下均表现稳定

一致性：20mL流通式加样盒在13个连续循环中，敲入效率与回收体积波动极小，表明系统具备高度工艺稳定性

从电转到扩增：

完整的细胞工程流程验证

在G-Rex®生物反应器中，LV PRO转染后的T细胞可实现53–70倍扩增，最终获得超过4亿个活细胞，验证了其在下游培养中的兼容性与可扩展性。

适配多种构建体与起始材料

无论是3.5kb还是1.4kb的HDR模板，LV PRO均可高效递送；同时支持不同来源的T细胞（PBMC、CD3+，激活或静息状态），为工艺开发提供更大灵活性。

总结

LV PRO，不只是“放大”，更是“复制”

Lonza的LV PRO模块不仅解决了非病毒递送在大体积下的效率瓶颈，更通过一致性、灵活性与可扩展性，为CGT制造流程提供了真正可复制的解决方案。

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